SolubleBioScience一直在為工業解決溶解度和穩定性問題。

我們為制藥和生物技術行業提供支持

·  優化蛋白質配方的服務

·  產品套件，提供溶解度和穩定性參數的早期解決方案評估

·  可以為希望在內部引入HSC技術的客戶購買儀器

許多蛋白質不是非常易溶或穩定，特別是在研究，治療，疫苗，科學試劑和工業酶通常需要的高濃度下。保持蛋白質可溶和穩定，直到它們準備好使用，是制造商和研究人員定期面臨的艱巨挑戰。蛋白質在純化和配方優化過程中經常顯示出不需要的聚集，這可能導致蛋白質活性的變化和配方團隊必須在過程早期解決的更高的免疫原性風險。

與傳統方法相比，SolubleBioScience提供的結果可以在更短的時間內以更低的成本促進蛋白質基制劑的溶解性和穩定性。

SolubleBioScience OptiSol蛋白質溶解度篩選試劑盒

OptiSol蛋白質溶解度篩選試劑盒

根據蛋白質分子的預期分子量選擇濾板。

描述

OptiSol™蛋白質溶解度試劑盒可幫助研究人員識別保護目標蛋白免于聚集或溶解聚集蛋白樣品的配方。

OptiSol蛋白質增溶篩選試劑盒包含一系列不同的緩沖液（pH 3至pH 10）和一系列溶解度增強劑（鹽，氨基酸，糖類，多元醇，還原劑），可以確定特定蛋白質的條件樣本受到保護以免聚合或可以解除聚合。可以在一個單一的無標記實驗中測試總共90種具有溶解度增強劑的不同配方; 剩下的6個實驗是陽性和陰性對照實驗。下表列出了OptiSol試劑盒中的所有試劑。

為何選擇OPTISOL？

找到蛋白質的溶解度點

OptiSol™蛋白質溶解度試劑盒可幫助研究人員識別保護目標蛋白免于聚集或溶解聚集蛋白樣品的配方。

•  快速評估聚合行為與pH，鹽和添加劑的關系
•  分析90多種不同條件并且無標記
•  簡單的混合和旋轉方案，無需超速離心
•  有機會拯救可逆聚集的蛋白質樣本
•  保護蛋白質免受壓力下的聚集*
•  使用Protein Dashboard快速查找趨勢

蛋白質聚集，這種不希望的過程通常由升高的溫度，劇烈攪拌，添加配體或分子結合配偶體或僅僅通過在一段時間內儲存蛋白質樣品引起。通過適當選擇pH，鹽或穩定添加劑，通常可以避免蛋白質聚集。這種OptiSol蛋白質增溶篩選試劑盒包含一系列不同的緩沖液（pH 3至pH 10）和一系列溶解度增強劑（鹽，氨基酸，糖類，多元醇，還原劑），可以確定特定的條件。保護蛋白質樣品免于聚集或可以解聚集。可以在一個單一的無標記實驗中測試總共90種具有溶解度增強劑的不同配方; 剩下的6個實驗是陽性和陰性對照實驗。

可溶性蛋白質通過過濾器，聚合蛋白質不通過。這個簡單的特征在過濾步驟中被利用。含有可溶性蛋白質的孔在過濾過程后會產生蛋白質; 蛋白質聚集體不含任何蛋白質。

運行蛋白質增溶試劑盒后，您已經確定了將蛋白質靶標保持在溶液中的條件，并且您知道蛋白質聚集的條件。然后選擇條件以獲得“表現良好的蛋白質”。

•  比傳統的試錯法測試更好，更快（不到1小時）
•  對于每個蛋白質溶解度數據點，低蛋白質消耗消耗少于10uL。蛋白質量需要與您的目標檢測分析相匹配
•  方便：一次性獲得大量蛋白質溶解信息。利用您自己選擇的目標特異性檢測。OptiSol蛋白質溶解度篩選試劑盒與許多功能分析，SDS-PAGE，蛋白質印跡，質譜分析和基于熒光的蛋白質檢測兼容。

應用

蛋白質溶解度篩選試劑盒OptiSol™的應用

OptiSol™蛋白質溶解度篩選試劑盒可用于保護目標蛋白質免受各種聚集誘導應激。當蛋白質溶液反復冷凍和解凍時，或者當液體暴露于高剪切力或強光下時，蛋白質在暴露于高溫時，當它們被儲存較長時間時，通常會聚集。空氣氧化，反應試劑或表面暴露提供了蛋白質聚集的進一步來源。

這些應激物可用于評估特定蛋白質樣品的易感性并鑒定保護劑。

如果你的挑戰是 -

•  不希望的抗體或蛋白質聚集
•  從純化柱洗脫過程中蛋白質的可逆沉淀
•  中性pH值下的不溶性蛋白質

如果你需要 -

•  篩選不同的緩沖液，以保持蛋白質在高濃度下穩定
•  保持抗原可溶，同時從緩沖液中去除某些成分
•  將結合的抗原 - 抗體復合物分離成未結合的形式
•  找到純化后蛋白質長期穩定性的宜條件。
•  優化凈化條件

技術

這是OPTISOL KITS的工作原理：

how-optisol- works-image-1

新的FASOS技術

OptiSol基于專有的FASOS技術。FASOS代表Filter Aided SolubilityOptimization Screening。將蛋白質溶液與許多不同的溶液分開混合，僅檢測通過分子量截止濾器（MWCO 30或MWCO 200）的那些蛋白質溶液。這種組合溶液和過濾方法確定了保持樣品溶解的宜p??H，鹽，緩沖液類型，添加劑和抗氧化劑。溶解聚集的蛋白質溶液（應用A）或選擇特定的樣品應激（加熱，凍融，儲存，剪切等），并確定那些使蛋白質樣品溶解而不會聚集的溶液。Protein Dashboard支持數據評估。

應用A：蛋白質溶解度分析
應用B：蛋白質聚集體增溶

如何-OPTISOL - 作品 - 應用 - 一個

如何-OPTISOL-工程應用-B

需要多少蛋白質？

當蛋白質溶液與制劑混合時，蛋白質濃度將在反應板中稀釋11倍（15μL/165μL）。因此，必須從儲備蛋白質溶液開始，該溶液是反應板中終溶液濃度的11倍。約2 mL蛋白質原液就足夠了。所需的蛋白質濃度取決于蛋白質的消光系數和蛋白質檢測測定的靈敏度。在我們的實驗室中，我們使用半寬UV 96孔板和UV / vis板讀數器開發了UV280方法。在我們的例子中，半寬UV280孔中的UV280吸光度必須至少約為0.4（吸光度單位）。

數據分析

使用蛋白質儀表板輕松進行數據分析

與OptiSol蛋白質溶解度篩選試劑盒一起提供Protein Dashboard™。這種新工具有助于發現蛋白質行為趨勢，并確定宜蛋白質溶解的關鍵溶劑因子。

Protein Dashboard™有助于發現蛋白質行為趨勢，并在單個實驗中確定宜蛋白質溶解的關鍵溶劑因子。只需將輸出數據剪切并粘貼到基于Excel的蛋白質儀表板中，即可查看目標蛋白質行為。

OptiSol™蛋白質溶解度篩選試劑盒可用于四種不同大小的蛋白質，如下所述。這些試劑盒中的每一個也可以一式三份（3X）提供。

常問問題

OptiPharma與OptiSol：我應該得到哪一個？

OptiPharma試劑盒中的所有成分（緩沖液和添加劑）（3個對照孔除外）均為FDA批準的藥物成分。如果您在藥物配方開發的任何階段都有藥物蛋白，OptiPharma就是其中之一。

OptiSol適用于各種類型的蛋白質工作（例如制藥，工業，食品，植物，結晶工作）。OptiSol試劑盒中的大多數添加劑不適用于藥物配方。例如，如果您想要溶解粗蛋白質混合物，OptiSol是一個很好的選擇。

我的聚合蛋白樣品是否會與OptiSol試劑一起“溶解”？

這取決于蛋白質聚集體的性質。找出答案的僅有方法是通過實驗測試 - 這正是OptiSol蛋白質溶解度篩選所做的。測試90種不同的溫和配方 - 不同的pH，鹽，聚合物，糖，多元醇，洗滌劑，還原劑。如果蛋白質樣品可逆地聚集，OptiSol篩選器可能會產生溶解樣品的條件。

使用的配方相當溫和。目標是溶解聚集體并產生功能性蛋白質。任何聚集的蛋白質樣品都會溶解嗎？不，有些聚合物只含有“死”蛋白質。對于這些頑固性樣品，您需要SDS或尿素，并獲得非功能性蛋白質作為回報。

運行OptiSol試劑盒需要多少蛋白質？

當蛋白質溶液與制劑混合時，蛋白質濃度將在反應板中稀釋11倍（15μL/165μL）。因此，必須從儲備蛋白質溶液開始，該溶液是反應板中終溶液濃度的11倍。約2 mL蛋白質原液就足夠了。所需的蛋白質濃度取決于蛋白質的消光系數和蛋白質檢測測定的靈敏度。在我們的實驗室中，我們使用半寬UV 96孔板和UV / vis板讀數器開發了UV280方法。在我們的例子中，半寬UV280孔中的UV280吸光度必須至少約為0.4（吸光度單位）。

如何分析OptiSol實驗的結果？

我們建議選擇敏感的蛋白質檢測分析來表征濾液，優選96孔格式。在大多數情況下，可以將平板讀數器數據直接復制并粘貼到Protein Dashboard™Excel電子表格中，以評估實驗結果并獲得蛋白質行為趨勢的圖形支持，并確定宜蛋白質溶解的關鍵溶劑因子。可用于確定過濾溶液中蛋白質的量或活性的診斷分析測試的實例。各種測定可以基于熒光或放射性的檢測（蛋白質測定，酶測定，Western / ELISA，配體結合測定）。請注意，分析可能需要對OptiSol配方進行補償，或者在OptiSol配方存在下可能無效。

哪種蛋白質分析與OptiSol配合得很好？

任何具有足夠特異性，動態范圍和靈敏度的蛋白質測定。一些研究人員運行點印跡（Western），一些具有熒光讀數，使用ELISA或使用酶活性測定。這取決于您，取決于您要篩選的內容。

可以使用功能測定（測量結合或酶活性）或被動測定（測量蛋白質質量）。

已經使用純化蛋白質樣品的幾個使用者已經使用了Pierce BCA測定法及其'MICRO'變體。

實驗需要多長時間？

這在某種程度上取決于您的設置，但計劃運行實驗約3小時。

我可以使用OptiSol套件處理多少樣品/每個套件中有多少“運行”？

OptiSol蛋白溶解度篩選試劑盒僅設計用于單一蛋白質樣品。雖然我們已經聽過多次成功使用過濾板的用戶，但我們不建議這樣做。多次使用終會阻塞過濾器并使結果不可靠。

蛋白質儀表板如何幫助分析我的數據？

歡迎您使用任何想要繪制的工具并可視化您的OptiSol結果。Protein Dashboard是繪制pH與其他參數的依賴關系的快速方法。這有助于快速概述和詳細了解蛋白質樣品的行為。

查看“數據分析”選項卡下的“蛋白質儀表板”視頻。

OptiSol試劑的成分是什么？

OptiSol試劑由組合溶液組成，具有多種pH，緩沖液類型，帶電和中性有機添加劑和抗氧化劑。OpitSol手冊和Protein Dashboard中列出了所有組件的詳細列表。

什么是Solubilisin II？

Solubilisin II是一種專有技術解決方案，已被證明可以在很寬的pH值范圍內促進溶解度并保護蛋白質免于聚集。

Solubilisin II可以用于體外PK研究嗎？

Solubilisin II尚未進行體內研究測試，僅應用于體外研究。OptiSol試劑盒提供的一些試劑含有少量的sodium azide，因此與活細胞不相容。OptiSol試劑盒僅用于體外使用，不適用于細胞或動物研究。

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