世界*實驗材料供應商Zymed Laboratories Inc正式授權上海起發為其中國代理，Zymed Laboratories Inc 在一直是行業的*,一直為廣大科研客戶提供zui為優質的產品和服務,上海起發一直秉承為中國科研客戶帶來的產品，的服務， 簽約Zymed Laboratories Inc 就是為了給廣大科研客戶帶來更加*的產品和服務,您的滿意將是我們zui大的收獲

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位于美國生物科技重要城市南加州的圣迭亞哥市，是一家以生產免疫學檢測試劑為主的綜合性生物技術公司。Zymed公司的業務主要分為兩大領域：生命科學和臨床病理診斷。Zymed公司的所有產品反映了其在的自我定位策略－即一家重視質量、專注于全面解決問題的開發商、生產商和營銷商。它在范圍內為生命科學研究、臨床研究、癌癥診斷領域提供高質量的試劑和試劑盒。Zymed公司歷史悠久，在抗體設計、開發、修飾、純化和生產方面有21年的專業研究史。Zymed公司得到 ISO 13485認證。

目前是Invitrogen大家庭中的一員。

公司：http://zh.invitrogen.com

大鼠總蛋白 (TP)說明書

產品名稱： 大鼠總蛋白 (TP)說明書

產品貨號： TP

產品規格： 48T/96T

試劑級別： 試劑級

產品產地： 美國

產品商標： USA

認證品牌：Zymed Laboratories (Invitrogen Zymed Laboratories)

保存與運輸： 低溫

產品詳細描述

                   大鼠總蛋白 (TP)酶聯免疫分析（ELISA）
試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
藥品名稱：
通用名：大鼠總蛋白 (TP)酶聯免疫分析試劑盒
使用目的：
本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿、或相關組織液中總蛋白 (TP)含量。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠總蛋白  (TP)水平。用純化的大鼠總蛋白
(TP)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入總蛋白 (TP)，再與HRP
標記的總蛋白 (TP)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物TMB
顯色。TMB在 HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深
淺和樣品中的總蛋白 (TP)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過
標準曲線計算樣品中大鼠總蛋白 (TP)含量。
試劑盒組成
1 20 倍濃縮洗滌液 30ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶
2 酶標試劑 6ml×1 瓶 8 標準品（720μg/ml） 0.5ml×1 瓶
3 酶標包被板 12 孔×8 條 9 標準品稀釋液 1.5ml×1 瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶 10 說明書 1 份
5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 張  
6 顯色劑B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 個
標本處理及要求
1．血清、血漿、腦脊液、腹腔液標本可直接測定；
2．不能檢測含NaN3的樣品，因 NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
3．采集后盡早進行實驗，若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反
復凍融。
操作步驟
1. 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔 10 孔，在*、第二孔中分別加標
準品 100μl，然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在*孔和第二
孔中先各取50μl棄掉；再各取50μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別
加標準品稀釋液 50μl，混勻后，再各取 50μl 分別加到第五、第六孔中，再在第五、第
六孔中分別加標準品稀釋液 50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取 50μl 分別加到
第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液 50μl，混勻后從第七、第
八孔中分別取 50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液 50μl，
混勻后從第九第十孔中各取 50μl 棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為 50μl，濃度分別為
480μg/ml，320μg/ml ，160μg/ml，80μg/ml，40μg/ml）。
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣
品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣
品zui終稀釋度為 5 倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。   
4. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，
重復 5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同 3。
8. 洗滌：操作同 5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光
15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加
液后 15分鐘以內進行。
計算
以標準物的濃度為橫坐標，OD 值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣
OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算
準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋
即為樣品的實際濃度。
注意事項
1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用，酶標包被板開封后
用完，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在5 分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。
4．請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本O
大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n 倍）后再測定
算時請zui后乘以總稀釋倍數（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
10.  如與英文說明書有異，以英文說明書為準。
檢測范圍：
20μg/ml -500μg/ml
規格：
96 人份/盒
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6個月

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上海起發實驗試劑有限公司
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