▌一、關(guān)于公司

NanoLight® Technologies 是 Prolume Ltd. 旗下專注于海洋生物發(fā)光技術(shù)應(yīng)用的技術(shù)分部，致力于將海洋來源的天然發(fā)光蛋白與發(fā)光底物的研究積累，轉(zhuǎn)化為可供科研與產(chǎn)業(yè)界日常使用的標(biāo)準(zhǔn)化試劑體系。

與依靠昆蟲螢光素系統(tǒng)（如螢火蟲熒光素酶）的傳統(tǒng)路線不同，NanoLight 所深耕的方向來自深海──從橈足類、水母、介形類等海洋發(fā)光生物中鑒定、重組并規(guī)模制備具備實(shí)用價(jià)值的發(fā)光蛋白（熒光素酶）及其對(duì)應(yīng)底物（腔腸素及其衍生物），再通過純化工藝、配方設(shè)計(jì)與批次質(zhì)控，把它們做成可以在普通實(shí)驗(yàn)室條件下穩(wěn)定儲(chǔ)存、可靠復(fù)現(xiàn)的試劑產(chǎn)品。

NanoLight 目前提供的產(chǎn)品覆蓋以下幾大功能模塊：

• NanoFuels® —— 各類發(fā)光底物與配套溶劑/緩沖體系（腔腸素及其衍生物、水溶性改性版本、專用溶劑等）

• NanoLights® —— 重組熒光素酶蛋白、發(fā)光蛋白及對(duì)應(yīng)表達(dá)體系（Gaussia、Renilla、Oplophorous/NanoKAZ 等）

• NanoFluors™ —— 熒光蛋白相關(guān)表達(dá)工具

• NanoTools —— 功能性偶聯(lián)物與檢測(cè)輔助試劑（如鏈霉親和素偶聯(lián)熒光素酶、多克隆/單克隆抗血清等）

這些模塊既可以獨(dú)立使用，也可以組合成完整的報(bào)告基因檢測(cè)、分子互作檢測(cè)或活體成像工作流，服務(wù)于基礎(chǔ)科研、藥物研發(fā)、分子診斷及農(nóng)業(yè)化學(xué)品篩選等多個(gè)方向。

中國(guó)地區(qū)相關(guān)產(chǎn)品的商務(wù)對(duì)接與技術(shù)支持，由授權(quán)代理商 上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司 承接。

?? 下圖為上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司作為美國(guó)NanoLight Technologies授權(quán)代理商的授權(quán)書

▌二、核心優(yōu)勢(shì)

① 發(fā)光蛋白譜系完整，分子量小、適配靈活

NanoLight 最核心的蛋白資產(chǎn)之一是高斯熒光素酶（Gaussia luciferase，GLuc）體系。GLuc 來源于海洋橈足類 Gaussia princeps，是一種分泌型熒光素酶，單體分子量?jī)H約 19 kDa，屬于已知發(fā)光強(qiáng)度較高的小型熒光素酶之一。由于它是分泌型的，表達(dá)后可將蛋白直接釋放到細(xì)胞培養(yǎng)上清中，這意味著：

• 檢測(cè)時(shí)往往不需要裂解細(xì)胞，取少量上清即可讀數(shù)；

• 可以設(shè)計(jì)縱向時(shí)間序列實(shí)驗(yàn)，在同一孔中連續(xù)追蹤同一樣本的發(fā)光變化；

• 對(duì)貼壁與懸浮體系均適用，兼容 96 孔 / 384 孔及更高密度板。

與之并列的還有海腎熒光素酶（Renilla luciferase，RLuc）體系與 Oplophorous 來源的 NanoKAZ/NLuc 體系，三者各有不同的動(dòng)力學(xué)特征（閃光型 vs 較持續(xù)的輝光型傾向）、不同的最適底物譜與不同的分子量/結(jié)構(gòu)約束，研究者可根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)做匹配選擇──而不是被綁定在某一種酶的單一特性上。

② 底物家族覆蓋全面，關(guān)鍵衍生物的引入拓展了應(yīng)用場(chǎng)景邊界

腔腸素（Coelenterazine）本身是一種對(duì)氧敏感的發(fā)光底物，天然狀態(tài)下疏水性強(qiáng)、溶解度有限，這在活體成像或較大體積體系中容易變成瓶頸。NanoLight 圍繞這一核心分子做了系統(tǒng)的衍生物與配方延伸：

• native Coelenterazine（CTZ）：經(jīng)典底物，適合體外體系與 BRET 等基礎(chǔ)框架

• h?Coelenterazine（CTZ?h）：苯環(huán)取代衍生物，發(fā)光峰值偏藍(lán)移，在特定 BRET 配置中是常用選項(xiàng)

• Coelenterazine?SOL（水溶性改性版本）：通過配方層面的溶解性優(yōu)化，使底物更適合體內(nèi)注射、微循環(huán)擴(kuò)散與較長(zhǎng)觀測(cè)窗口的實(shí)驗(yàn)

• Prolume Purple™：一種進(jìn)一步結(jié)構(gòu)優(yōu)化的腔腸素類似物，在蛋白質(zhì)?蛋白質(zhì)相互作用研究中被用于替代早期常用的 DeepBlueC™ 路線，發(fā)光顏色更深紫/藍(lán)，背景更低

• Methoxy?eCTZ 等其他變體：為特定波長(zhǎng)需求與特定酶動(dòng)力學(xué)提供額外調(diào)節(jié)余地

此外，NanoLight 不只賣"裸底物粉末"，還配套提供 NanoFuel® Solvent 等專用復(fù)溶劑與 5× Universal Lysis Buffer 等預(yù)制緩沖液，使研究者不必自行試錯(cuò)配制溶劑體系。

③ 凍干保護(hù)氣封裝 + 室溫和控溫運(yùn)輸策略，到貨穩(wěn)定性更有保障

多數(shù) NanoLight 的腔腸素類底物以 凍干（lyophilized）/干燥形式 提供，并在密封管中充入保護(hù)性氣體。這一做法的直接好處是：

• 大幅降低底物在運(yùn)輸途中因溶液態(tài)氧化降解而失活的風(fēng)險(xiǎn)；

• 在不少品規(guī)下可以實(shí)現(xiàn)室溫或普通冷鏈即可運(yùn)輸（具體以每件產(chǎn)品的說明書建議溫度為準(zhǔn)），減輕國(guó)際運(yùn)輸鏈條中的溫控壓力；

• 抵達(dá)實(shí)驗(yàn)室后，使用者按說明書指示用指定溶劑復(fù)溶，分裝凍存，即可進(jìn)入常規(guī)實(shí)驗(yàn)循環(huán)。

對(duì)于國(guó)內(nèi)課題組而言，這意味著從下單到拿到可用試劑的鏈路更穩(wěn)定，批次間差異也更容易通過廠家側(cè)的統(tǒng)一質(zhì)控來壓制。

④ 信號(hào)半衰期經(jīng)過緩沖體系優(yōu)化，適配高通量讀數(shù)與縱向監(jiān)測(cè)

生物發(fā)光反應(yīng)中有一類常見困擾：加底物后信號(hào)迅速達(dá)峰然后陡降（"flash"行為），導(dǎo)致多板操作用戶在"加底物→讀數(shù)"的時(shí)間差里引入系統(tǒng)性偏移。

NanoLight 的若干檢測(cè)試劑（以 GLuc GLOW Assay / NLuc GLOW Assay 等為代表）在設(shè)計(jì)上引入了配套緩沖環(huán)境，使發(fā)光信號(hào)從單純的瞬閃型向更平緩的輝光（glow）型過渡，信號(hào)穩(wěn)定窗口可延展到數(shù)十分鐘乃至數(shù)小時(shí)量級(jí)（例如 GLuc 體系在合適配方下信號(hào)半衰期可達(dá)約 2–3 小時(shí)的區(qū)間，實(shí)際數(shù)值受溫度、pH、底物濃度、細(xì)胞體系影響）。這種延展帶來的實(shí)際意義是：

• 多塊 384 孔板的自動(dòng)化讀數(shù)中，先后順序造成的信號(hào)落差變小；

• 手工操作的小平臺(tái)也能獲得可重復(fù)的讀值，不需要注射式讀板機(jī)也可起步；

• 時(shí)間序列采樣不必?fù)?dān)心"因?yàn)樽x數(shù)間隔拉長(zhǎng)就丟信號(hào)"。

⑤ 可定制空間大，愿意接"標(biāo)準(zhǔn)目錄之外"的需求

除目錄化常規(guī)品外，NanoLight 也提供面向特定需求的定制試劑服務(wù)──比如特殊規(guī)格的底物、特定偶聯(lián)形式的酶（GLuc?SA / NLuc?SA 這類鏈霉親和素偶聯(lián)物已在目錄中，但更復(fù)雜的項(xiàng)目可走溝通定制路線）、或與客戶聯(lián)合確定實(shí)驗(yàn)參數(shù)建議。對(duì)于做長(zhǎng)期篩選平臺(tái)建設(shè)的藥企 / CRO 而言，這種靈活性意味著試劑供應(yīng)不是一個(gè)黑盒，而是可以隨項(xiàng)目一起演化的合作環(huán)節(jié)。

▌三、熱門產(chǎn)品介紹

◆ 3.1 腔腸素類底物（Coelenterazine 家族 · NanoFuels®）

? 品名：Coelenterazine（天然腔腸素 / CTZ）

產(chǎn)品特點(diǎn)

Coelenterazine 是多種海洋生物發(fā)光系統(tǒng)的共同底物/輔因子，能在對(duì)應(yīng)熒光素酶（如 Renilla luciferase、Gaussia luciferase 等）催化下與氧氣反應(yīng)，釋放出光子。它在 BRET 體系、體外熒光素酶報(bào)告檢測(cè)、以及部分體外分子互作檢測(cè)中是基礎(chǔ)底物選項(xiàng)。

存儲(chǔ)條件

• 原始凍干粉：通常建議 ≤ –20 ℃ 避光干燥保存，管內(nèi)為保護(hù)氣氛密封；

• 復(fù)溶后：依說明書用推薦溶劑（如 NanoFuel Solvent 或無水乙醇/甲醇體系，具體以隨批 COA 為準(zhǔn)）溶解，分裝后 –20 ℃ 或 –80 ℃ 避光保存，避免反復(fù)凍融；

• 操作中盡量避光、避免接觸強(qiáng)氧化劑。

工作原理

在熒光素酶存在時(shí)，Coelenterazine 被氧化脫羧，同時(shí)發(fā)射光子（峰值波長(zhǎng)因酶/底物組合而不同，常見在 400–490 nm 附近）。發(fā)光強(qiáng)度在一定范圍內(nèi)與酶量或酶活性正相關(guān)，因此可通過讀板機(jī)定量反推報(bào)告基因表達(dá)水平、或監(jiān)測(cè)酶標(biāo)體系中催化劑的存在狀態(tài)。

使用方法（典型體外 RLuc / GLuc 檢測(cè)中的通用順序）

1. 按說明書將凍干 CTZ 用指定溶劑全溶解，配成儲(chǔ)備液（例如 1–5 mM，具體濃度依實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)）；

2. 將培養(yǎng)終止后的細(xì)胞裂解液（或培養(yǎng)上清，若測(cè)分泌型 GLuc）轉(zhuǎn)移至不透光/黑板；

3. 加入預(yù)定體積的 CTZ 工作液（終濃度通常在微摩爾級(jí)，需預(yù)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化）；

4. 輕柔混勻，靜置短暫平衡（通常數(shù)十秒到數(shù)分鐘），放入讀板機(jī)設(shè)定好積分時(shí)間讀數(shù)；

5. 每次建議做標(biāo)準(zhǔn)曲線或同批陽(yáng)性對(duì)照，以校正底物活力與儀器響應(yīng)。

? 品名：h?Coelenterazine（CTZ?h）

產(chǎn)品特點(diǎn)

CTZ?h 是在腔腸素苯環(huán)位引入取代基的衍生物，發(fā)光光譜相對(duì)天然 CTZ 有一定藍(lán)移，在 BRET1 或 BRET2 配置（以 RLuc 為能量供體、以 GFP/YFP 等為受體的融合蛋白體系）中常被選用。它的化學(xué)穩(wěn)定性與溶解性仍需要避光低溫管理，但信號(hào)特征與天然 CTZ 有所區(qū)分，給了波長(zhǎng)匹配更多余地。

存儲(chǔ)條件

與 CTZ 類似：凍干粉 ≤ –20 ℃ 避光干燥；復(fù)溶后分裝避光冷凍保存，盡量減少空氣接觸。

工作原理

與 CTZ 相同催化氧化發(fā)光原理；區(qū)別在于供體發(fā)光峰與受體激發(fā)峰之間的光譜重疊程度不同，研究者可以通過更換為 CTZ?h 來調(diào)整 FRET/BRET 通道串?dāng)_與動(dòng)態(tài)范圍。

使用方法（BRET 簡(jiǎn)要框架）

1. 預(yù)先用 CTZ?h（或 CTZ）工作液孵育表達(dá) RLuc?融合蛋白的細(xì)胞/裂解液；

2. 供體（RLuc）發(fā)光的同時(shí)，若空間上靠近的受體（如 YFP）在 F?rster 半徑內(nèi)，則發(fā)生非輻射能量轉(zhuǎn)移，受體發(fā)出自身特征熒光；

3. 分別讀取供體通道（~480 nm 附近）與受體通道（~530 nm 附近，依受體而定），計(jì)算 BRET 比值 = 受體信號(hào) / 供體信號(hào)；

4. 藥物或突變引起的構(gòu)象變化/解離會(huì)使比值下降，從而實(shí)現(xiàn)活細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)互作的動(dòng)態(tài)追蹤。

? 品名：Coelenterazine?SOL（水溶性腔腸素，體內(nèi)成像專用版本）

產(chǎn)品特點(diǎn)

這是腔腸素家族中針對(duì)體內(nèi)應(yīng)用做過溶解性改良的版本。普通 CTZ 在水相中極易析出，直接尾靜脈或腹腔注射時(shí)常需助溶劑（DMSO/乙醇比例一高就對(duì)小鼠有刺激），而 Coelenterazine?SOL 的目標(biāo)是在可接受注射體積內(nèi)保持底物可溶、分散均勻，從而讓活體生物發(fā)光信號(hào)更強(qiáng)、分布更可控。

存儲(chǔ)條件

凍干粉形態(tài)同樣建議冷凍避光干燥保存；復(fù)溶時(shí)使用配套或說明書中允許的溶劑體系（通常為水性緩沖+輔助溶劑的混合），制備成可注射的工作液后一般 冰上短期放置、盡快使用，長(zhǎng)時(shí)間存放仍以凍存分裝為佳。

工作原理

與 CTZ 全一致──仍然是熒光素酶催化底物氧化反應(yīng)發(fā)光，只不過這里的光子源位于活體動(dòng)物內(nèi)部（腫瘤細(xì)胞、免疫細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因報(bào)告小鼠等表達(dá)熒光素酶的組織），穿過組織衰減后被 IVIS 類活體成像系統(tǒng)接收。

使用方法（活體成像通用流程）

1. 確認(rèn)動(dòng)物模型已成功表達(dá)目標(biāo)熒光素酶（如通過質(zhì)粒、慢病毒、AAV 或轉(zhuǎn)基因）；

2. 按體重計(jì)算 Coelenterazine?SOL 注射劑量，經(jīng)指定途徑（常見為腹腔 IP 或尾靜脈 IV）給藥；

3. 等待底物分布平衡（通常數(shù)分鐘，依底物動(dòng)力學(xué)與給藥途徑而定，常見 5–20 min 窗口需預(yù)實(shí)驗(yàn)標(biāo)定）；

4. 麻醉動(dòng)物并放入活體成像系統(tǒng)采集光子圖；

5. 同一批動(dòng)物可在合理間隔后復(fù)用（需留出底物代謝清除時(shí)間），用于腫瘤生長(zhǎng)縱向監(jiān)測(cè)。

? 品名：Prolume Purple™（紫色發(fā)光腔腸素類似物）

產(chǎn)品特點(diǎn)

Prolume Purple 是一種經(jīng)過結(jié)構(gòu)修飾的腔腸素類似物，其發(fā)光峰值進(jìn)一步向短波/紫藍(lán)光推移（名義上在 ~540–590 nm 激發(fā)態(tài)轉(zhuǎn)移體系下的表現(xiàn)被用來與經(jīng)典 DeepBlueC™ 做比較），在需要更低背景、更特定波長(zhǎng)窗口的蛋白質(zhì)互作或特殊報(bào)告配置中提供額外的底物選項(xiàng)。

存儲(chǔ)條件

凍干粉末避光冷凍保存；復(fù)溶分裝避光凍存，操作全程注意避光與低溫。

工作原理

仍然是基于熒光素酶?腔腸素氧化發(fā)光框架，但發(fā)光光譜與化學(xué)穩(wěn)定性改變后，更適合某些對(duì)藍(lán)色通道串?dāng)_敏感的檢測(cè)布局──例如部分 BRET 或蛋白質(zhì)片段互補(bǔ)（PCA）場(chǎng)景中，需要用紫色/藍(lán)紫信號(hào)與綠色熒光通道拉開距離。

使用方法

基本與 CTZ?h / CTZ 流程一致，核心差異在于工作濃度與檢測(cè)波長(zhǎng)設(shè)置需要根據(jù)所用酶（多為 RLuc 衍生變體）重新優(yōu)化，建議始終做無酶空白與飽和酶對(duì)照來框定動(dòng)態(tài)范圍。

◆ 3.2 熒光素酶蛋白試劑（NanoLights®）

? 品名：Native Gaussia Luciferase（天然高斯熒光素酶，重組蛋白）

產(chǎn)品特點(diǎn)

GLuc 是以分泌型著稱的小型熒光素酶，單體約 19 kDa，無需細(xì)胞裂解即可在上清中檢測(cè)到強(qiáng)發(fā)光信號(hào)。NanoLight 提供的重組 GLuc 為純化蛋白形式（典型純度標(biāo)示可達(dá) 95% 級(jí)別），適合用作：

• 陽(yáng)性對(duì)照（標(biāo)定底物活性 / 讀板機(jī)響應(yīng)）

• 體外直接催化體系搭建（如傳感器構(gòu)建、體外偶聯(lián)檢測(cè)原型驗(yàn)證）

• 與鏈霉親和素偶聯(lián)版本（GLuc?SA）搭配形成"捕獲→發(fā)光讀出"的雙抗夾心或生物化分子檢測(cè)路線

存儲(chǔ)條件

凍干或溶液形態(tài)依具體交付規(guī)格而定，一般要求 –20 ℃ 或 –80 ℃ 避光保存，避免反復(fù)凍融；含蛋白的溶液態(tài)制品尤其要注意防止表面吸附損失（可用低濃度 carrier protein 或硅化管協(xié)助穩(wěn)定，具體依說明書）。

工作原理

GLuc 催化腔腸素類底物（特別是 CTZ / CTZ?h，也視情形用其他衍生物）氧化發(fā)光。由于它是分泌型酶的重組形式，不存在亞細(xì)胞定位遮擋問題──加入底物即反應(yīng)，因此很適合做"酶量?發(fā)光值"的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

使用方法（直接酶活檢測(cè)舉例）

1. 用合適的緩沖液（如 PBS 或 Tris?pH 7.4，視體系而定）稀釋 GLuc 儲(chǔ)備液到工作濃度；

2. 加入 CTZ 工作液（終濃度依預(yù)實(shí)驗(yàn)定，常見在 1–10 µM 量級(jí)的范圍做梯度測(cè)試）；

3. 即刻或短暫孵育后讀發(fā)光值；

4. 若做標(biāo)準(zhǔn)曲線，至少設(shè) 5–6 個(gè)倍比稀釋點(diǎn)，R2 > 0.99 的區(qū)間才是后續(xù)樣品定量可信區(qū)間。

? 品名：Gaussia Luciferase?Streptavidin 偶聯(lián)物（GLuc?SA）

產(chǎn)品特點(diǎn)

將 GLuc 共價(jià)偶聯(lián)到鏈霉親和素（Streptavidin）上，利用 SA 對(duì)生物（biotin）的強(qiáng)親和力（Kd ~ 10?1? M 級(jí)），使研究者可以把"生物化探針 → SA 捕獲 → 發(fā)光讀出"串聯(lián)起來。常見用途包括：檢測(cè)生物化 DNA/RNA、多肽、蛋白，或作為免疫檢測(cè)中的報(bào)告臂（先用生物化一抗/二抗捕獲目標(biāo)，再用 GLuc?SA 發(fā)光讀出）。

存儲(chǔ)條件

蛋白偶聯(lián)物對(duì) freeze?thaw 更敏感，通常建議分裝凍存（–20 ℃ 或 –80 ℃），含穩(wěn)定劑（甘油/BSA 依批注而定），操作中冰上放置、用低吸附管。

工作原理

本質(zhì)仍是 GLuc 催化 CTZ 發(fā)光，只是 GLuc 現(xiàn)在被"錨定"在 SA 上，而 SA 又通過四個(gè)亞基同時(shí)結(jié)合多個(gè)生物位點(diǎn)──這一放大結(jié)構(gòu)使得在固相（板/bead）或原位捕獲場(chǎng)景中，發(fā)光信號(hào)可以被有效富集到局部空間再讀出。

使用方法（生物化分子檢測(cè)示意）

1. 將捕獲層（如鏈霉親和素包被板，或反向：目標(biāo)分子的特異性捕獲抗體包被板）準(zhǔn)備好；

2. 加入含生物化待測(cè)分子的樣本，完成結(jié)合；

3. 洗板后，加入 GLuc?SA 偶聯(lián)物孵育，使 SA 結(jié)合殘余/鄰近的游離生物位點(diǎn)或設(shè)計(jì)好的橋接位點(diǎn)；

4. 再次洗滌去除未結(jié)合偶聯(lián)物，加入 CTZ 底物讀發(fā)光。

? 品名：NLuc?SA（Oplophorous 來源 NanoKAZ/NLuc 的鏈霉親和素偶聯(lián)物）

與 GLuc?SA 平行的另一條路線。NLuc（NanoLuc®/NanoKAZ 體系，來源于深海蝦 Oplophorus gracilirostris）同樣是小型熒光素酶，且在某些工程化變體中以"較持久輝光 + 小分子底物"著稱。NanoLight 將其做成 SA 偶聯(lián)形式，用途同上（生物化分子檢測(cè)、報(bào)告放大），底物通常會(huì)配對(duì)選用與其動(dòng)力學(xué)匹配的腔腸素衍生物或?qū)俚孜矬w系。

存儲(chǔ)條件：同類蛋白偶聯(lián)物規(guī)范，凍存分裝、避反復(fù)凍融、含穩(wěn)定劑配方依批次 COA。

◆ 3.3 預(yù)制檢測(cè)試劑盒與配套緩沖液

? 品名：GLuc GLOW Assay（高斯熒光素酶 輝光型檢測(cè)試劑）

產(chǎn)品特點(diǎn)

這是一套面向分泌型 GLuc 的"接近單步"發(fā)光檢測(cè)體系，核心改進(jìn)在于把底物與緩沖環(huán)境配成能讓發(fā)光信號(hào)在數(shù)分鐘到數(shù)小時(shí)內(nèi)保持相對(duì)平穩(wěn)的輝光態(tài)，從而緩解 flash 型底物那種"加完底物 10 秒內(nèi)就得讀完"的操作焦慮。

存儲(chǔ)條件

試劑盒各組分依標(biāo)簽標(biāo)識(shí)存放──通常液體試劑 4 ℃ 或 –20 ℃（視批次而定），避光；凍干組件按凍干品管理。開封后依照說明書建議的有效期窗使用（一般 1–3 個(gè)月不等，以實(shí)際標(biāo)注為準(zhǔn)）。

工作原理

GLuc 分泌到上清中 → 取等量或按比例稀釋的上清 + 加入預(yù)混的檢測(cè)試劑（含 CTZ 或其衍生物 + 輝光緩沖）→ 反應(yīng)生成持續(xù)發(fā)光 → 讀板機(jī)積分讀數(shù) ∝ 酶量 ∝ 驅(qū)動(dòng) GLuc 的啟動(dòng)子/信號(hào)通路活性。

使用方法（常規(guī) 96 孔示例）

1. 細(xì)胞培養(yǎng)到指定時(shí)間點(diǎn)（如藥物處理 6 h / 24 h / 48 h）；

2. 若需要細(xì)胞計(jì)數(shù)歸一化，可另取一塊平行板做 DNA/蛋白歸一化，或在同板做完發(fā)光后補(bǔ)做 MTT/CCK/BCA（注意相互干擾，建議分開板）；

3. 取 10–50 µL 上清轉(zhuǎn)入黑板（不透光底更佳），加入等體積或說明書指定比例的 GLuc GLOW 試劑；

4. 混勻、室溫靜置（常見 5–30 min，取決于體系與期望的穩(wěn)定平臺(tái)），設(shè)定讀板機(jī)積分時(shí)間（如 0.5–5 s/well）讀數(shù)；

5. 數(shù)據(jù)表達(dá)為 RLU（相對(duì)發(fā)光單位），組間比較需固定培養(yǎng)密度、加樣體積與讀數(shù)延遲時(shí)間。

? 品名：NLuc GLOW Assay（NanoKAZ/NLuc 輝光型檢測(cè)試劑）

流程與 GLuc GLOW 類似，但配對(duì)的是 NLuc/NanoKAZ 體系，底物配方對(duì)應(yīng) Oplophorous 系腔腸素衍生物。對(duì)于胞內(nèi)表達(dá) NLuc 的情形，通常需要先做輕微裂解（或使用 NanoFuel 5× Universal Lysis Buffer 這類預(yù)制裂解液），再取裂解上清進(jìn)行發(fā)光讀數(shù)。

? 品名：Firefly Luciferase Assay Reagent（螢火蟲熒光素酶檢測(cè)試劑）

NanoLight 同樣提供螢火蟲（Firefly）方向的發(fā)光檢測(cè)試劑，用于那些已經(jīng)建立在 firefly luciferase（Fluc）+ D?熒光素體系上的傳統(tǒng)報(bào)告基因平臺(tái)。Fluc 信號(hào)通常在 ATP/Mg2?/氧氣存在下催化 D?熒光素氧化發(fā)光，與 GLuc/RLuc 分屬不同波長(zhǎng)區(qū)間，兩者可組成 雙報(bào)告系統(tǒng)（如 Fluc 做測(cè)試、RLuc/GLuc 做內(nèi)參），前提是底物加入順序與波長(zhǎng)拆分設(shè)置正確。

? 品名：NanoFuel® Solvent（專用復(fù)溶劑）

產(chǎn)品特點(diǎn)

不是所有溶劑都等于"能溶腔腸素又不殺細(xì)胞"。NanoFuel Solvent 的定位是為凍干腔腸素類底物提供一條可控的復(fù)溶路徑：足夠溶解力、足夠純凈、批次間揮發(fā)殘留與酸堿性受控。

存儲(chǔ)條件

室溫或 4 ℃ 密封保存，避免敞口揮發(fā)與水分吸入；遠(yuǎn)離氧化劑與強(qiáng)堿。

使用方法

按產(chǎn)品頁(yè)/COA 標(biāo)示的 mg→mL 換算，將溶劑精確加入凍干管，輕柔渦旋至全溶解（通常呈淡黃色至無色，若有微量不溶顆粒需按說明是否離心/過濾），即為儲(chǔ)備液。此后按實(shí)驗(yàn)所需濃度用緩沖液二次稀釋──不要把高濃度儲(chǔ)備液直接當(dāng)工作液加到細(xì)胞上，有機(jī)溶劑終濃度往往需要對(duì)細(xì)胞做耐受測(cè)試（常見要求 < 0.5–1% v/v）。

? 品名：NanoFuel® 5× Universal Lysis Buffer（5× 通用裂解液）

產(chǎn)品特點(diǎn)

為報(bào)告基因檢測(cè)提供預(yù)制的高濃度裂解基底（含去污劑/緩沖鹽體系），使用時(shí)按 1× 稀釋后與細(xì)胞孵育，釋放胞內(nèi)熒光素酶但不使其過度變性，隨后直接與對(duì)應(yīng)底物試劑配對(duì)讀數(shù)。

存儲(chǔ)條件

通常 4 ℃ 或 –20 ℃（視具體批次標(biāo)簽），避免反復(fù)室溫放置；若見渾濁或析出，按說明書指示是否允許溫和混勻或是否需要換新分裝。

◆ 3.4 螢火蟲熒光素（Firefly Luciferin）

? 品名：Firefly Luciferin Free Acid（D?熒光素游離酸）

產(chǎn)品特點(diǎn)

螢火蟲發(fā)光體系的底物，F(xiàn)luc 的經(jīng)典搭檔。可用于體外裂解液檢測(cè)，也可用于 Fluc 轉(zhuǎn)基因小鼠的活體成像（經(jīng)腹腔/尾靜脈給予 D?熒光素鹽或游離酸轉(zhuǎn)鈉后的溶液──體外化學(xué)轉(zhuǎn)化依規(guī)程）。

存儲(chǔ)條件

凍干粉末避光、干燥、≤ –20 ℃ 保存；復(fù)溶后分裝 –20 ℃ / –80 ℃ 避光，避免反復(fù)凍融與氧化。

▌四、它可以解決實(shí)驗(yàn)里的哪些具體問題

? 低豐度信號(hào)檢不出、背景吃掉一切

傳統(tǒng)的一些報(bào)告基因檢測(cè)在弱啟動(dòng)子、負(fù)調(diào)控、或下游信號(hào)被部分抑制時(shí)，會(huì)出現(xiàn)"信號(hào)剛出噪聲線"的情況。NanoLight 的小型海洋熒光素酶體系（尤其分泌型 GLuc）因?yàn)閱挝幻噶慨a(chǎn)光能力強(qiáng)、發(fā)光法本身沒有外源激發(fā)光背景（不像熒光法要扛自發(fā)熒光），在低背景環(huán)境中能把微弱變化拉開到可量化范圍。對(duì)那些需要檢測(cè) 轉(zhuǎn)錄抑制程度、miRNA 靶向效應(yīng)、信號(hào)通路微調(diào) 的項(xiàng)目來說，這種背景優(yōu)勢(shì)是實(shí)質(zhì)收益。

? 閃光型底物太快，"加完底物手就抖"

讀板機(jī)一次只能讀一塊板，但如果你有 6 塊 384 孔板等著讀，而底物在加完后 30 秒內(nèi)達(dá)峰、90 秒衰減過半──你得到的不是生物學(xué)差異，是"先加先衰"的操作偽影。

GLuc/NLuc GLOW 類型的配方思路正是針對(duì)這一點(diǎn)：把反應(yīng)推進(jìn)到更可控的穩(wěn)態(tài)段，使讀數(shù)窗口從"秒級(jí)競(jìng)賽"變成"十分鐘可從容讀完一塊板"的節(jié)奏，多板之間的差異更多回到孔間真值而非操作時(shí)序。

? 腔腸素難溶、體內(nèi)成像信號(hào)彌散

CTZ 直接扔進(jìn)水里不溶，用高比例有機(jī)助溶劑又刺激動(dòng)物──這導(dǎo)致活體成像時(shí)要么信號(hào)弱、要么分布怪、要么動(dòng)物狀態(tài)受影響。Coelenterazine?SOL 這條產(chǎn)品線存在的理由就是把這個(gè)"溶解?注射?擴(kuò)散?毒性"三角矛盾往可行方向推一步：可注射的水相容性更好，信號(hào)在組織中的富集更有規(guī)律，腫瘤生長(zhǎng)曲線可以更干凈。

? 同位素法能出數(shù)但安全管理成本高

部分傳統(tǒng)方法依賴 3H/32P 或 12?I 標(biāo)記，靈敏但帶來輻射安全許可、廢物處置、人員培訓(xùn)與設(shè)備隔離等一系列組織成本。NanoLight 的非放射性發(fā)光報(bào)告體系并不能聲稱"處處比同位素更靈敏"（尤其在單分子計(jì)數(shù)意義上），但在絕大多數(shù)細(xì)胞水平報(bào)告基因、互作追蹤、篩選讀出場(chǎng)景中，它提供足夠的靈敏度，且日常管理回到"化學(xué)品 + 生物安全二級(jí)常規(guī)規(guī)范"的范疇，對(duì)平臺(tái)長(zhǎng)期運(yùn)行更友好。

? 雙報(bào)告 / 多通道拆分需要光譜正交性

當(dāng)你需要同時(shí)歸一化（如 Fluc 做測(cè)試、RLuc 做內(nèi)參），或用 BRET 做活細(xì)胞互作（供體發(fā)光→受體熒光），你需要供體與受體的光譜有足夠間距。NanoLight 提供 CTZ / CTZ?h / Prolume Purple 等不同光譜特征的底物，加上 GLuc / RLuc / NLuc 不同波長(zhǎng)傾向的酶，等于給了你一套可調(diào)的"波長(zhǎng)調(diào)色盤"，讓雙通道串?dāng)_可以被實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)壓下去。

? 批量篩選需要批次一致性，不能每批換個(gè)性狀

藥企或 screening core 的痛點(diǎn)之一是：試劑批次一換，整條 dose?response 曲線漂移，歷史數(shù)據(jù)對(duì)齊困難。NanoLight 在底物生產(chǎn)中采用批次控制策略（凍干工藝、保護(hù)氣封裝、COA 對(duì)關(guān)鍵參數(shù)留檔），目的就是把"試劑"這件基礎(chǔ)變量盡可能做成定值而不是噪聲源。

▌五、購(gòu)買與使用中的常見疑問（Q & A）

Q1：我是第一次用 GLuc 系統(tǒng)，應(yīng)該買哪些東西起步？

A：最小起步組合通常是「GLuc 報(bào)告基因載體/表達(dá)系統(tǒng)（從你熟悉的分子生物學(xué)渠道獲取）」+「CTZ 或 CTZ?h 底物」+「NanoFuel Solvent」；如果想省去自己調(diào)緩沖的麻煩，可直接選 GLuc GLOW Assay 試劑盒。建議第一批同時(shí)訂購(gòu)一個(gè)小規(guī)格的 Native Gaussia Luciferase 重組蛋白 作為陽(yáng)性對(duì)照──它能幫你判斷"底物有沒有活性、讀板機(jī)通道對(duì)不對(duì)、稀釋倍數(shù)是否落在線性區(qū)"，比盲調(diào)細(xì)胞快很多。

Q2：腔腸素類底物看起來怕光怕氧，收到后怎么轉(zhuǎn)存最穩(wěn)？

A：到貨后立即檢查包裝是否完整、管蓋是否密封。凍干粉先原管 –20 ℃ 或 –80 ℃ 避光放好，不要提前打開。只有準(zhǔn)備做實(shí)驗(yàn)時(shí)才取出一支、按說明書加 NanoFuel Solvent 全溶解→分裝成單次用量小份（如 10–20 µL/管）→標(biāo)好濃度、日期、批號(hào)→回凍。日常工作中，永遠(yuǎn)假設(shè)腔腸素在溶液態(tài)是倒計(jì)時(shí)狀態(tài)，所以分裝 > 反復(fù)凍融，避光 > 省這一步鋁箔。

Q3：你們說可室溫運(yùn)輸，是不是代表它不怕常溫？

A：不是。凍干保護(hù)氣封裝提升了運(yùn)輸韌性，不等于"隨便放桌上一個(gè)月也沒事"。運(yùn)輸是為了到達(dá)，到達(dá)后的規(guī)范是：凍干粉冷凍避光、復(fù)溶后冷凍避光分裝。這是所有腔腸素類產(chǎn)品的通用紀(jì)律。

Q4：體內(nèi)成像我該選 CTZ?SOL 還是普通 CTZ？

A：只要你的路徑是給活鼠注射然后在 IVIS 上采圖，優(yōu)先選 Coelenterazine?SOL（或?qū)ｉT標(biāo)明 in vivo 用途的品規(guī)）。普通 CTZ 的溶解性問題會(huì)在注射環(huán)節(jié)反噬──底物析出堵針、分布不均、信號(hào)飄忽。即便用 SOL 版本，也要按文獻(xiàn)/說明書確認(rèn)注射體積、劑量、采圖延遲時(shí)間這三者的匹配關(guān)系，最好在自己實(shí)驗(yàn)室條件下先做一只 pilot 標(biāo)定信號(hào)—時(shí)間曲線。

Q5：GLuc 是分泌型的，我能不能只用上清、不裂不做標(biāo)準(zhǔn)曲線？

A：可以做上清直讀，這是 GLuc 的優(yōu)勢(shì)。但需要提醒兩點(diǎn)：第一，分泌效率受細(xì)胞狀態(tài)、培養(yǎng)基血清含量、孔邊緣效應(yīng)影響，如果各孔間細(xì)胞數(shù)差異大（如藥物本身有增殖/毒性），只報(bào) RLU 不加歸一化會(huì)引入系統(tǒng)偏差──此時(shí)建議平行板做蛋白/DNA 歸一化，或用 RLuc/Fluc 做第二報(bào)告歸一化。第二，上清直讀的"線性范圍"仍然需要你用重組 GLuc 蛋白跑一次標(biāo)準(zhǔn)曲線來確認(rèn)──不要默認(rèn)任意稀釋度都在線性區(qū)。

Q6：BRET 實(shí)驗(yàn)到底選 CTZ 還是 CTZ?h 還是 Prolume Purple？

A：取決于你的受體是什么。經(jīng)典 RLuc ? GFP10/YFP 體系里，CTZ 與 CTZ?h 都是常見選項(xiàng)；CTZ?h 的藍(lán)移發(fā)光有時(shí)能改善供體/受體通道分光效果。Prolume Purple 則面向那些"需要更紫的光、更低供體通道串入受體通道"的配置，或用于特定 PCA（蛋白質(zhì)片段互補(bǔ)）架構(gòu)。穩(wěn)妥的建議是：不要只看供體峰在哪里，要看最終 BRET 比值（受體/供體）的動(dòng)態(tài)范圍與 S/B（信號(hào)/背景）在你自己的細(xì)胞系里實(shí)測(cè)值是多少──理論光譜和細(xì)胞里實(shí)際光學(xué)環(huán)境經(jīng)常有出入。

Q7：你們的試劑盒和市面其他品牌的熒光素酶檢測(cè)試劑盒有什么區(qū)別？

A：NanoLight 的差異化不在于泛用熒光素/螢火蟲方向（那里競(jìng)爭(zhēng)已經(jīng)很成熟），而在于它自身的源頭資產(chǎn)──海洋熒光素酶（GLuc / RLuc / NLuc）及其腔腸素底物家族的垂直整合：底物是自己做的、偶聯(lián)物是自己做的、緩沖配方是與底物動(dòng)力學(xué)一起調(diào)過的。這意味著如果你的項(xiàng)目本來就建在 GLuc 或 RLuc 上，用同平臺(tái)的 NanoFuel 配套溶劑/檢測(cè)試劑，變量更少、調(diào)試鏈路更短。如果你用的是 Firefly 體系且沒有海洋熒光素酶需求，那 Firefly 檢測(cè)試劑部分更多是作為平臺(tái)補(bǔ)充存在，選型時(shí)按自己實(shí)驗(yàn)室已有習(xí)慣與報(bào)價(jià)走即可。

Q8：采購(gòu)時(shí)是否需要特殊資質(zhì)？

A：NanoLight 的大部分目錄產(chǎn)品屬于科研用生化試劑/酶/底物范疇，不屬于管制化學(xué)品或放射性源，常規(guī)實(shí)驗(yàn)室采購(gòu)流程即可。但具體入境清關(guān)與校內(nèi)危化/劇品臺(tái)賬歸類請(qǐng)以所在機(jī)構(gòu)國(guó)資/安全辦要求為準(zhǔn)──部分有機(jī)溶劑溶劑瓶（NanoFuel Solvent）在標(biāo)簽上可能帶有易燃液體標(biāo)識(shí)，倉(cāng)儲(chǔ)時(shí)注意遠(yuǎn)離明火與熱源。

Q9：如果我想做大批量篩選（HTS），你們能否保證批次持續(xù)供貨？

A：這是 NanoLight 明確提到的服務(wù)方向之一──為底物與緩沖體系提供批次控制與規(guī)模化交付。具體到大批量定制規(guī)格、交貨期、COA 參數(shù)范圍、最小起訂量，需要在采購(gòu)前由 上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司 協(xié)助與廠家側(cè)確認(rèn)項(xiàng)目需求（預(yù)計(jì)月消耗量、所需品規(guī)、希望的交付節(jié)奏），再做書面確認(rèn)。不建議直接按零售品規(guī)"手動(dòng)乘以 100"來推定大批量行為──大批量真正的隱性成本是批次一致性，而不是單價(jià)小數(shù)點(diǎn)后幾位。

Q10：運(yùn)輸途中萬一冷鏈斷了怎么辦？?jī)龈煞圻€能用嗎？

A：這也是為什么 NanoLight 主流品以"凍干+保護(hù)氣"出貨──它對(duì)溫度波動(dòng)的容忍度顯著高于溶液態(tài)。但"更能扛"不等于"隨便扛"。收貨時(shí)建議檢查：外箱有無明顯破損、管內(nèi)凍干餅是否移位碎裂、密封鋁帽是否完整。若運(yùn)輸記錄顯示曾長(zhǎng)時(shí)間超過標(biāo)注儲(chǔ)存溫度上限，安全的做法是先拍照留證、暫不投入使用，聯(lián)系 上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司 走質(zhì)量確認(rèn)流程。多數(shù)情況下凍干粉性狀穩(wěn)定，但科學(xué)上是"外觀正常≠活性正常"，關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)建議跑一次陽(yáng)性對(duì)照酶（GLuc 重組蛋白 + 底物）驗(yàn)證信號(hào)水平是否在歷史批間容差內(nèi)。

關(guān)鍵詞：nanolight，nanolight上海代理，nanolight中國(guó)代理，nanolight北京代理，nanolight江蘇代理， nanolight廣東代理,399-1, 320-50, 301-5, 340-1, 340-10, 321-100, 399-10, 369-5, 301-1, 369-1, 3011-500, 306-250, 303-500, 301-10, 371-50, 3031，nanolight、NanoLight Technologies 中國(guó)代理、上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司、NanoLight 生物發(fā)光試劑、腔腸素 Coelenterazine、高斯熒光素酶 GLuc、海腎熒光素酶 RLuc、NanoKAZ NLuc、生物發(fā)光檢測(cè)、BRET 生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移、Prolume Purple、Coelenterazine h、Inject-A-Lume、NanoFuel 溶劑、活體成像 底物、報(bào)告基因檢測(cè)、藥物篩選 發(fā)光法、GPCR 檢測(cè)、光遺傳學(xué) 生物發(fā)光、非放射性 替代檢測(cè)

更多產(chǎn)品信息，請(qǐng)聯(lián)系NanoLight Technologies授權(quán)代理商：上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司

（注：本文內(nèi)容基于品牌公開資料及行業(yè)常規(guī)信息整理，具體以品牌信息文檔為準(zhǔn)。）

??熱賣產(chǎn)品